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產(chǎn)品名稱：糖原合成酶（GCS）試劑盒規(guī)格

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6666

測(cè)定意義

GCS（EC 2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷鍵相連延長糖鏈，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰島素作用的主要靶酶，對(duì)糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。

測(cè)定原理：

GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH下降速率，即可反映GCS活性。

需自備的儀器和用品：

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化Src原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 Anti-GDNF 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

Phospho-FAK (Tyr925) 英文名稱： 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Smad2(Thr220) 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

MSLN(mesothelin) 間皮素(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh P95/NBS1 DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 規(guī)格 0.2ml

SULT1B1 Kit Human 人 SULT1B1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TXNDC11 英文名稱： 硫氧還蛋白11抗體 0.2ml

C8orf4 英文名稱： 8號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml

Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Phospho-Smad2(Ser245 + Ser250 + Ser255) 英文名稱： 磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 0.1ml

phospho-eIF4EBP1+2+3 (Thr45) 英文名稱： 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 0.1ml

磷酸化蛋白激酶B抗體 anti-P-AKT1/PKB1/2/3 0.1ml

Anti-SYK/FITC 熒光素標(biāo)記非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Mre11 (Ser676) 磷酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 規(guī)格 0.1ml

GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環(huán)水解酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
糖原合成酶（GCS）試劑盒規(guī)格辛酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC))奈達(dá)鉑組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）琥珀酰明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒

異辛(standard for GC, ≥99.5% (GC))3-吲哚甲酸（鹽酸托烷司瓊雜質(zhì)）體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）琥珀酰明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒

丁酸乙酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))塞曲司特基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）捕獲檢測(cè)試劑盒

甲基烯酸乙酯(standard for GC,≥99.5%(GC))氫西酞普蘭組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）捕獲檢測(cè)試劑盒

乙酯(Standard for GC,>99.5%(GC))利拉萘酯體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）捕獲檢測(cè)試劑盒

酸乙酯(standard for GC,≥99.5%(GC))馬來酸氟伐沙明基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）捕獲檢測(cè)試劑盒

乙酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))利扎曲普坦組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）捕獲檢測(cè)試劑盒

己酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC)) 二乙酰氨乙酸乙二體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-9）捕獲檢測(cè)試劑盒
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。