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產(chǎn)品中心

PRODUCTS CNTER

當前位置:首頁產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白
產(chǎn)品簡介

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:RNA核suan外切mei2同源物(REXO2)重組蛋白英文名稱:Recombina RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)松弛su/胰島su樣肽受體1(RXFP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1 (RXFP1)基質(zhì)金屬9(M

更新時間:2023-03-21
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:498
產(chǎn)品型號:
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公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白

Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::溶酶體

預(yù)測分子量:33.8kDa

實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:His319~Pro579 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:6.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human SECISBP2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human TGFB1I1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human NES宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human CD335宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

PIRH2產(chǎn)品名稱: 泛su連接mei抗體交叉反應(yīng): ROR beta產(chǎn)品名稱: 維甲suan相關(guān)孤兒受體β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep

CK18產(chǎn)品名稱: 細胞角蛋白18抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

SLAMF7產(chǎn)品名稱: SLAMF7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

GPR176產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Leptin receptor產(chǎn)品名稱: 瘦su受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

phospho-AKT1 (Ser129)產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiB抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse

ADAMTS13產(chǎn)品名稱: 整合su樣金屬蛋白mei與凝mei13型抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Biglycan產(chǎn)品名稱: 骨/軟骨蛋白多糖1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒anti-Q-Ab抗Q熱抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA Kit

人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒anti-Mi2-Ab抗Mi2抗體elisa檢測試劑盒Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit

人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒anti-Ku-Ab抗Ku抗體elisa kitHuman anti-Ku-antibody ELISA Kit

人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒anti-IgA-Ab抗IgA抗體ELISA試劑盒Human anti-IgA antibody ELISA Kit

人抗G2s抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG抗G2s抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-G2s antibody IgG ELISA Kit 


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