產(chǎn)品名稱：肝癌細(xì)胞;Hep B1.2

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9858

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

增食欲素-A/欲A  ORX-A 0.2ml

Salmonella 英文名稱： 沙門氏菌抗體(多型) 0.2ml

phospho-EGFR (Tyr1197) 英文名稱： 磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Ser1303) 磷酸化谷受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml

CR (Calretinin) 鈣結(jié)合蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 Camk1g 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDEF/SPDEF 上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體 規(guī)格 0.1ml

Actin,Skeletal Muscle 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

TEX261 英文名稱： TEX261蛋白抗體 0.2ml

Cecropin 英文名稱： 肽/天蠶肽抗體 0.2ml

 Camk1g 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey  rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

Phospho-FAK (Tyr925) 英文名稱： 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體  GDNF 0.1ml

 phospho-Src(pTyr529)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化Src原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Smad2(Thr220) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse  rat IgM 小鼠抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
肝癌細(xì)胞;Hep B1.2白細(xì)胞增長培養(yǎng)液500毫升強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)（MERCK方法）

DMEM*培養(yǎng)液500毫升人c-fos ELISA試劑盒,

DMEM*培養(yǎng)液（無）500毫升人顆粒酶B（Gzms-B）ELISA試劑盒,

RPMI 1640*培養(yǎng)液500毫升人膜輔蛋白（MCP/CD46）ELISA試劑盒,

RPMI 1640*培養(yǎng)液（無）500毫升小鼠抗內(nèi)膜抗體（EMAb）ELISA試劑盒,

細(xì)胞*培養(yǎng)液500毫升小鼠甲狀腺過氧化物酶（TPO）ELISA試劑盒,

細(xì)胞增長培養(yǎng)液500毫升大鼠丙二醛（MDA）ELISA試劑盒,

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液500毫升大鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒,

人體NK細(xì)胞*培養(yǎng)液100毫升大鼠β內(nèi)啡肽（β-EP）ELISA試劑盒,

全血基因組DNA純化試劑盒50次大鼠透明質(zhì)酸（HA）ELISA試劑盒,

大量全血基因組DNA純化試劑盒（20毫升全血）10次大鼠紅生成素（EPO）ELISA試劑盒,

樹脂法微量全血DNA純化試劑盒20次兔子甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒,

全血線粒體DNA萃取試劑盒10次鉤端螺旋體IgG（Lep IgG）ELISA試劑盒--動物，人

白細(xì)胞裂解液10毫升人水通道蛋白2（AQP-2）ELISA試劑盒,

血清樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒20次人8-異構(gòu)前列腺素F2α（8-epi-PGF2α）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。