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產(chǎn)品名稱：堿性磷酸酶（AKP/ALP）測(cè)試盒規(guī)格

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6434

測(cè)定意義

AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。

測(cè)定原理：

在堿性環(huán)境中，AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與4-氨基安替比和鐵化鉀反應(yīng)紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測(cè)定510 nm吸光度增加速率，來計(jì)算AKP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化孕受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml

角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體 Anti-KGFR 0.2ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

FOXH1 英文名稱： 叉頭蛋白H1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin(Ser25) 磷酸化原癌基因蛋白18 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml

JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 規(guī)格 0.1ml

單組分AEC染色試劑盒 200片/20ml 需用甘油封固,紅色

VAPB 英文名稱： 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B 0.2ml

DNA polymerase mu 英文名稱： DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體 0.2ml

Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SorLA/LRP9 英文名稱： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 0.2ml

ER81 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 0.2ml

壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 Anti-TRAF1 0.2ml

Anti-TRADD/FITC 熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml

PS-1，Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
堿性磷酸酶（AKP/ALP）測(cè)試盒規(guī)格1-溴3-氯烷(>97%,BR)木犀草素3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒

溴代庚烷(>98%,BR)木犀草苷生物素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒

1-溴代萘(>98%,BR)沒食子酸生物素化學(xué)底物復(fù)合試劑盒

溴辛烷(>98%,BR)蒙花苷通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒

1-甲基咪唑(>98%,BR)莽草酸可溶性總核蛋白制備試劑盒

1-乙基咪唑(>98%,BR)芹菜素組織可溶性總核蛋白制備試劑盒

1-萘乙(>98%,BR)青藤堿可溶性總蛋白制備試劑盒

乙酸-1-萘酯(>98%,BR)齊墩果酸組織可溶性總蛋白制備試劑盒
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。