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產(chǎn)品中心

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當前位置:首頁產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒花青素合成系列乳酸脫氫酶(LDH)測試盒說明書

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒說明書
產(chǎn)品簡介

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更新時間:2022-03-10
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:798
產(chǎn)品型號:
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶(LDH)測試盒說明書

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測試方法:微量法、可見分光光度法

貨號:YS-01S6323

測定意義

LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。

測定原理:

LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與2, 4 - *肼作用生成丙酮酸*腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

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樣品制備:

1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。

2). 過濾混濁溶液。

3). 除去樣品中的CO 2 。

4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。

6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。

7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。

9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10).含脂肪的樣品用熱水提取。

特點:

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌受體α多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

自分泌運動因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

Neurobasal Medium 500ml Gibco

ZNF516 英文名稱: 鋅指蛋白516抗體 0.2ml

DR4/ 英文名稱: 死亡受體4抗體 0.1ml

自分泌運動因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml

SCF/MGF ELISA Kit 大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-AVEN/FITC 熒光素標記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Exendin 4 GLP1類似蛋白Exendin4抗體 規(guī)格 0.1ml

Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 96T

英文名稱: 抗體 0.2ml

Amyloid Precursor Protein 英文名稱: 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml

Anti-AVEN/FITC 熒光素標記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

ZNF575 英文名稱: 鋅指蛋白575抗體 0.2ml

Deltex 1 英文名稱: DTX1抗體 0.2ml

擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 Anti-ATM 0.1ml

Anti-WBSCR14/ChREBP /FITC 熒光素標記糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR(Tyr845) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

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操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。


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