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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7291大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 英文名稱 | Rat Coronary Artery Endothelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7291 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
簡(jiǎn)稱 CAECs
組織來(lái)源 冠狀動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,是一薄層的專門上皮細(xì)胞,它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑:0.25%、多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×)或明膠包被液(1mg/mL)、PBS、培養(yǎng)基
包被條件:PLL(0.1mg/mL)或明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 培養(yǎng)基(含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代比例:1:2
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
?
取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無(wú)菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:
?
原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾。
通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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