細胞簡介：

產品名稱 大鼠髂動脈內皮細胞

組織來源 髂動脈

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠髂動脈內皮細胞分離自髂動脈組織；髂總動脈位于機體的盆腔，大鼠的髂總動脈有兩條，也就是臨床上左右兩條分支，它是由腹部主要的動脈演化而來，由腹部的腹主動脈沿著機體的脊柱方向向下進行，到達第4腰椎后開始分成兩支，這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細血管之間的管道，它接近心室的部分，管徑大，管壁較厚。經過反復分支，管徑逐漸變小，管壁變薄，后形成與毛細血管構造相似的毛細血管前小動脈，與毛細血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄，雖相差很大，但構造上均有共同之處。一般均由3層膜組成，內層稱為內膜，由內皮及縱行排列的結締組織構成；中間的一層稱為中膜，由環形排列的組織構成；外的一層叫外膜，由縱行排列的結締組織構成。動脈內皮細胞是覆蓋在主動脈內面的單層細胞，可分泌一系列血管活性物質而保持血管穩態，當其受到炎癥或其它因素刺激后穩態被破壞而導致一些心血管疾病的發生。因此，動脈內皮細胞已成為研究心血管疾病發病機制及治療藥物的工具。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內皮細胞是沿著整個循環系統，由心臟直至小的微血管。

方法簡介 實驗室分離的大鼠髂動脈內皮細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠髂動脈內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑：0.25%、多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×）或明膠包被液（1mg/mL）、PBS、培養基

包被條件：PLL（0.1mg/mL）或明膠（0.1%）

培養基：大鼠髂動脈內皮細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：內皮細胞樣

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。