商品屬性：

產品信息：

產品名稱 大鼠軟骨細胞

組織來源 軟骨組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 大鼠軟骨細胞分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細胞、基質及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞，以后逐漸變為軟骨母細胞，并形成軟骨基質，細胞被埋在軟骨陷窩內而變為靜止的軟骨細胞。根據軟骨組織內所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介 實驗室分離的大鼠軟骨細胞采用膠原酶-聯合消化制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的大鼠軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑：0.25%、PBS、培養基

培養基：大鼠軟骨細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：梭形、多角形

傳代比例：1:2

傳代特性：可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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