商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 大鼠外周血白細(xì)胞

簡稱 PBL;PWBC

組織來源 外周血

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡介 大鼠外周血白細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細(xì)胞。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細(xì)胞和無粒白細(xì)胞。前者常簡稱為粒細(xì)胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細(xì)胞核；其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。

方法簡介 實驗室分離的大鼠外周血白細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的大鼠外周血白細(xì)胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 大鼠外周血白細(xì)胞 培養(yǎng)基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 懸浮

細(xì)胞形態(tài)： 圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 不增殖；不傳代

消化液：0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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