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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7268大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng) | 英文名稱 | Rat Cardiomyocytes |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7268 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠心肌細(xì)胞
組織來源 心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 大鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細(xì)胞培養(yǎng)2 h后開始貼壁,呈梭形;到12 h左右,細(xì)胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細(xì)胞分離培養(yǎng)48 h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng);心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn),并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng),且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡(jiǎn)便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcomeric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、 多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)
培養(yǎng)基: 大鼠心肌細(xì)胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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