商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 大鼠眼動脈平滑肌細(xì)胞

組織來源 眼動脈

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡介 眼動脈是眼眶及內(nèi)容物主要的血液供應(yīng)，是頸內(nèi)動脈主要分枝，也是交通顱內(nèi)外血管的重要通道。有研究結(jié)果認(rèn)為，絕大多數(shù)眼動脈起源于ICA剛出海綿竇處，且多數(shù)起源于ICA床突上段內(nèi)上壁，少數(shù)起源于上壁，少數(shù)眼動脈可起源于ICA海綿竇段及腦膜中動脈。眼動脈的走行分為顱內(nèi)段、管內(nèi)段及眶內(nèi)段，眼動脈在管內(nèi)段一般行走于視神經(jīng)上方，顱內(nèi)段和眶內(nèi)段再分為五段：1、短臂；2、A角；3、長臂；4、B角；5、遠(yuǎn)側(cè)部。眼動脈進(jìn)入眶內(nèi)后沿視神經(jīng)向下外側(cè)走行，終止于眶孔的上內(nèi)側(cè)角。眼動脈的分枝一般分為眼組、眶組及眶外組。眼組分為視網(wǎng)膜動脈睫前動脈及眼球的脈絡(luò)叢；眶組分為淚腺動脈和肌動脈；眶外組分為篩后動脈、篩前動脈、眶上動脈、瞼內(nèi)側(cè)動脈、鼻背動脈（終末枝）。眼動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。眼動脈供應(yīng)整個眼球、眼球附屬器及部分附近組織的營養(yǎng)。眼動脈可發(fā)生痙攣、血栓、栓塞及出血等，均可嚴(yán)重影響視力。頸內(nèi)動脈眼動脈瘤簡稱眼動脈瘤，又稱床突旁動脈瘤或頸內(nèi)動脈腹側(cè)動脈瘤。眼動脈瘤是位于眼動脈和后交通動脈之間的動脈瘤，占全部顱內(nèi)動脈瘤的0.47%-9.26%，30%-70%患者表現(xiàn)為SAH，1/3有視功能損傷，如視力減退、視野缺損和視神經(jīng)等。體外培養(yǎng)的眼動脈平滑肌細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠眼動脈平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠眼動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 大鼠眼動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 成纖維細(xì)胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液：0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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