細胞簡介：

產品名稱 雞滑膜細胞

組織來源 滑膜組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 雞滑膜細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎（OA）以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的細胞群體，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。滑膜細胞主要功能：①滑膜細胞產生潤滑液成分，并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。

方法簡介 實驗室分離的雞滑膜細胞采用混合酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的雞滑膜細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 雞滑膜細胞培養基(基礎培養基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液：0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。