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原代細(xì)胞
兔原代細(xì)胞
YS-01X8351兔肝枯否細(xì)胞規(guī)格





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PRODUCT CATEGORY相關(guān)文章
ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 兔肝枯否細(xì)胞規(guī)格 | 英文名稱 | Rabbit Kupffer Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X8351 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔肝枯否細(xì)胞
簡(jiǎn)稱 KCs
組織來(lái)源 肝臟組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 兔枯否細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中的消化腺,為紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。枯否氏細(xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來(lái)的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌、異物和衰老的紅細(xì)胞,并把血紅蛋白分解成。此外,肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,參與免疫調(diào)節(jié)的作用。枯否氏細(xì)胞和般巨噬細(xì)胞不同,枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用。枯否氏細(xì)胞能吞噬來(lái)自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害。枯否細(xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝枯否細(xì)胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝枯否細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: (12 mM) 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 兔肝枯否細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長(zhǎng)特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、巨噬細(xì)胞
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液: (12 mM)
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無(wú)菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾。
通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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