商品屬性：

產品信息：

產品名稱 小鼠腸神經嵴干細胞

組織來源 腸組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠腸神經嵴干細胞分離腸組織；神經嵴干細胞（neural crest stem cells, NCSC），即外周神經系統干細胞，起源于胚胎期的神經管背側，與中樞神經系統干細胞在形態學上有著顯著不同，NCSC可表達低親和力神經營養因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質細胞，而中樞神經系統干細胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織，如神經元、神經膠質、黑色素細胞、內分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經系統中神經元和神經膠質的NCSC，被稱為腸神經嵴干細胞（gut neural crest stem cells, GNCSC）。

方法簡介 實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞采用-膠原酶聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠腸神經嵴干細胞經Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養基

培養基： 小鼠腸神經嵴干細胞培養基(含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 懸浮

細胞形態： 球形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳2-3代

消化液： 0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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