商品屬性：

產品信息：

產品名稱 小鼠心臟干細胞

組織來源 心臟組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠心臟干細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞持正常的代謝和功能。研究發現，心臟干細胞是種多潛能細胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內皮細胞。體內研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細胞，經體外簡單培養、增殖和標記后，移植到心肌梗死邊緣區域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區域發現有標記的心肌細胞、平滑肌細胞和內皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小，但表達些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內外可以分化成心肌細胞、血管內皮細胞和平滑肌細胞，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經成為目前研究的熱點。短期內獲得治療量的自體心臟干細胞是這治療應用于臨床的關鍵所在。因此，研究種新的分離培養方法可在短時期內獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之。

方法簡介 實驗室分離的小鼠心臟干細胞采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結合差速貼壁、心臟干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠心臟干細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養基： 小鼠心臟干細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 長梭形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳2-3代左右

消化液： 0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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