商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 豬骨骼肌衛(wèi)星細胞

組織來源 骨骼肌組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 豬骨骼肌衛(wèi)星細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖。每肌原纖都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有條較明亮的線稱H線。H線的中部有M線。明帶中間，有條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段，叫做個肌節(jié)。肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖（肌細胞）外的種扁平、有突起的細胞。著于肌纖（肌細胞）表面；當肌纖（肌細胞）受損后，肌衛(wèi)星細胞可增殖分化，參與肌纖（肌細胞）的修復(fù)，因此具有干細胞性質(zhì)。

方法簡介 實驗室分離的豬骨骼肌衛(wèi)星細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合多次差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的豬骨骼肌衛(wèi)星細胞經(jīng)Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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