1.腫瘤細胞目標長度為18–30個核苷酸。

2.嘗試將熔解溫度限制在55至65?C，溫度相差小于5?C。

3.如果引物的Tm值較低，則尋找G和C含量更高的序列，或者稍微延長引物的長度。

4.GC的目標含量為40-60%，3’端的C或G可促進結合。

5.一般在引物的5’限制性位點處添加3-4個核苷酸，以實現切割。

6.避免二級結構區，富含GC和富含AT的結構域應分布均衡。

7.避開連續四個或更多的同一堿基重復或二核苷酸重復。

8.避免引物之間的互補（引物內有超過三個堿基互補）或引物內部形成互補（正向和反向引物具有互補序列）。

9.如果您將引物用于克隆，我們推薦采用卡套柱純化，以達到zui低純度水平。

10.如果您將腫瘤細胞引物用于突變實驗，則在引物中間設計錯配堿基。
 NCK銜接因子蛋白2IgG     細胞色素c氧化酶7A2    小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)
 Nemo樣激酶IgG     細胞色素C氧化酶亞基3    小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)
 NFAM1IgG     細胞色素c氧化酶COX7A2    小鼠糖原合成酶激酶(GSK)
 NFkB誘導的激酶IgG     細胞色素C氧化酶亞基6B    小鼠糖皮質類固醇受體(GR)
 NF-κB活化激酶IgG     激活素受體2A    小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)
 NK細胞表面抑制性受體CD94IgG     β-抑制蛋白1    小鼠糖蛋白130(gp130)
 NK細胞受體/自然殺傷細胞活化性受體IgG     磷酸化β抑制蛋白1    小鼠碳酸酐酶2(CA-2)
 NK細胞受體2A/自然殺傷細胞活化性受體2AIgG     β-抑制蛋白2    小鼠碳酸酐酶(CA)
腫瘤細胞