1. 原代細(xì)胞抗原的密度
① 高表達(dá)的抗原可選擇幾乎所有的熒光素；
② 低密度表達(dá)的抗原需要可提供較高S/N比值的熒光素如PE/APC。

2. 自發(fā)熒光
① 每種細(xì)胞群都有不同水平的自發(fā)熒光；
② 所有的熒光通道均可觀察到自發(fā)熒光，但自發(fā)熒光強(qiáng)度在波長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)迅速降低；
③ 對(duì)自發(fā)熒光較強(qiáng)的細(xì)胞，選擇發(fā)射波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光素（如APC）可得到較好的S/N比值；
④ 對(duì)自發(fā)熒光比較弱的細(xì)胞，發(fā)射波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光素對(duì)S/N提高沒有明顯的改善。可選用FITC。

3. 非特異結(jié)合
① 許多熒光抗體可產(chǎn)生低水平的非特異結(jié)合，使陰性細(xì)胞群的熒光超出自發(fā)熒光；
② 非特異結(jié)合由下列因素引起：
單克隆抗體的同型抗體：一些IgG同型抗體可能與一些細(xì)胞上的Fc受體結(jié)合；
所用的熒光素：羰花青染料（如CY3、CY5、CY5.5、CY7）和Tex-Red直標(biāo)的抗體及一些復(fù)合染料標(biāo)記的抗體在標(biāo)記某些亞群的細(xì)胞時(shí)有時(shí)會(huì)提高結(jié)合率；對(duì)CY5來說，是因?yàn)樵撊玖吓c低親和力Fc受體的極低親和力相互作用。這也是復(fù)合染料PE-CY5的特性。

4. 復(fù)合染料：小心信號(hào)衰退
① 復(fù)合染料因?yàn)楣狻⒐潭▌┗驕囟壬邥?huì)致信號(hào)衰退，是復(fù)合染料在上一級(jí)染料處發(fā)光。該種現(xiàn)象從一小部分亞群開始，導(dǎo)致APC或PE染色細(xì)胞群假陽性；
② 減少樣本暴露于光、高溫或固定劑，可很大程度上避免這一問題；
③ 選擇染料時(shí)需要考慮：復(fù)合染料的信號(hào)衰退會(huì)不會(huì)降低APC或PE的靈敏度。如果是，就要選擇另外的試劑搭配；
④ 原代細(xì)胞如果樣本需要固定，要選擇穩(wěn)定的固定劑，可有效阻止復(fù)合染料的信號(hào)衰退。
L-4-Hydroxyisoleucine    HPLC≥98%    L-4-羥基異亮氨酸
        
Secoisolariciresinol Diglucoside    HPLC≥98%    亞麻木酚素(SDG)
α-mangostin    HPLC≥98%    α-倒捻子素
β-mangostin    HPLC≥98%    β-倒捻子素
3-isomangostin    HPLC≥98%    3-異倒捻子素
Cichoric Acid    HPLC≥98%    菊苣酸
    HPLC≥98%    梭砂貝母堿
Momordin Ic    HPLC≥98%    地膚子皂苷Ic
Pectolinarin    HPLC≥98%    大薊苷（柳穿魚葉苷）
2"-O-galloylhyperin    HPLC≥98%    2”-O-沒食子酰基金絲桃苷
9-methoxycamptothecine    HPLC≥98%    9-甲氧基喜樹堿
原代細(xì)胞