技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES裂谷熱病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含...
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAkit注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用...
同白斑綜合癥病毒PCR檢測試劑盒檢測方法:?1.Ⅰ法:在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。定量PCR擴增熒光曲線圖PCR產(chǎn)物熔解曲線圖2.TaqMan探針法:探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測...
牛C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒實驗操作步驟:1,試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。2,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。5,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。6,洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。8,嚴格按照說明書的操作...
犬鳥嘌呤核苷酸交換因子1(GEF1)ELISA檢測試劑盒注意事項:1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(0.1-20...
猴血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)ELISA試劑盒注意事項:1.當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。5.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它的試劑替換試劑盒中的試劑。
小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒液體類標本收集:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心2...
大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒操作步驟:1,試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。2,實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6,洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光...
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