91视频久久I99热日韩I国产久在线观看I物业福利视频I玖玖爱在线观看I国产激情久久久I亚洲第一av网I国产69熟I哪个网站可以看avI乐播av一区二区三区I69视频在线看Iwww一区二区I伊人最新网址I污站在线观看I国产一区在线看I欧美在线视频网I中文日韩avIav中文字幕免费I国产视频日韩欧美I色戒未删除完整版I亚洲在线资源

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項(xiàng)

1.原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以70%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株之操作。2.無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、...

原代細(xì)胞復(fù)蘇技術(shù)

1.原代細(xì)胞凍存復(fù)蘇技術(shù)簡(jiǎn)介在ELISPOT檢測(cè)的應(yīng)用中，往往需要用到凍存的淋巴細(xì)胞樣品作為檢測(cè)細(xì)胞。由于ELISPOT檢測(cè)的是細(xì)胞的免疫功能，不僅僅需要保持細(xì)胞的存活率，而且還要保證細(xì)胞的功能不發(fā)生變化。傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存方法通常是為了保存細(xì)胞株，對(duì)細(xì)胞存活率的要求不高，更沒(méi)考慮保持細(xì)胞原有的免疫狀態(tài)，所以傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存方法已經(jīng)不能滿足ELISPOT檢測(cè)的要求。參見(jiàn)圖7.1?？紤]到ELISPOT檢測(cè)的特殊性，荷蘭U-CyTech公司經(jīng)過(guò)精心的研究與反復(fù)的驗(yàn)證，推出了Cryost...

細(xì)胞常見(jiàn)的保存方法

原代細(xì)胞保存溫度越低，保存時(shí)限更長(zhǎng)；溫度越低，對(duì)細(xì)胞傷害越大；低溫也不怕，我有防凍劑（e.g.甘油）。下面的表格就是五種常見(jiàn)保存細(xì)菌細(xì)胞的方法和大約時(shí)限。保存條件溫度°C大約時(shí)間瓊脂平板44-6周（AgarPlate）穿刺培養(yǎng)基43周-1年（stabculture）冰凍-201-3年超低溫冰凍-201-10年凍干≤415年+但是，具體到你用的那一種菌用什么方法保存能夠保存多長(zhǎng)時(shí)間，就要視情況而定了，并沒(méi)有一個(gè)*答案，上表中所列出來(lái)的時(shí)限一般來(lái)說(shuō)是適用大部分細(xì)菌樣本的。小編如果...

細(xì)胞同步化實(shí)驗(yàn)操作步驟

在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞多處于不同的細(xì)胞周期時(shí)相中。不同時(shí)相的細(xì)胞對(duì)藥物干預(yù)存在不同的反應(yīng)，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性，因此需要制備細(xì)胞周期一致的細(xì)胞。細(xì)胞同步化是解決該問(wèn)題的好辦法。細(xì)胞同步化是利用藥物或其他方法使細(xì)胞停止在細(xì)胞周期的某個(gè)時(shí)相的技術(shù)，其基本原則是使細(xì)胞停留在細(xì)胞周期的特定時(shí)相上；停滯過(guò)程可以通過(guò)調(diào)節(jié)，恢復(fù)細(xì)胞周期；恢復(fù)后所有細(xì)胞以一致的步調(diào)在細(xì)胞周期中運(yùn)行。細(xì)胞同步化實(shí)驗(yàn)為特定細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變、細(xì)胞動(dòng)力學(xué)、細(xì)胞周期調(diào)控以及細(xì)胞在不同時(shí)相中對(duì)藥物的敏感性研究奠定了基礎(chǔ)。...

細(xì)胞懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟

細(xì)胞系懸液標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)步驟(1)取材：收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞于離心管中，800～1000r／min離心10min，棄上清，彈指法混勻細(xì)胞。沿管壁加入2．0％～2．5％冷戊二醛，輕輕吹打，4℃固定30min。用小鋁片將細(xì)清。4℃PBS緩沖液沖洗1～2h或過(guò)夜，1000r／min離心5min，棄上清。(2)制備預(yù)包埋塊：管內(nèi)加入2％～4％37℃瓊脂糖液0．1～0．5ml，兩手搓離心管，使細(xì)胞系與瓊脂糖混勻，室溫冷卻，形成細(xì)胞瓊脂凝膠預(yù)包埋塊。離心管內(nèi)加適量PBs緩沖液或75％乙醇溶液...

原代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

原代細(xì)胞培養(yǎng)：1、實(shí)驗(yàn)材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進(jìn)行細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)。2、無(wú)菌操作。操作時(shí)用的培養(yǎng)液，可加平時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細(xì)胞時(shí)，注意酶液的濃度和控制消化時(shí)間。貼塊法分離細(xì)胞時(shí)，注意動(dòng)作要輕柔，不要傷到細(xì)胞組織，組織塊邊緣盡量平整有利于細(xì)胞游離。4、培養(yǎng)液的選擇。不同的細(xì)胞有對(duì)培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)的要求不同，根據(jù)所分離細(xì)胞的特性選擇。人支氣管上皮細(xì)胞微小RNA英文名稱：HBEpiCmiRNA規(guī)格:1µg2µg5&...

腫瘤細(xì)胞凍存保護(hù)劑

腫瘤細(xì)胞很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑，它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒(méi)有的準(zhǔn)則，但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護(hù)劑。其他凍存保護(hù)劑可根據(jù)情況使用，可單獨(dú)使用也可聯(lián)合使用，包括：聚乙烯乙二醇（polyethyleneglycol），丙烯乙二醇（propyleneglycol），甘油（glycerine），聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrolidone），山梨醇（sorb...

人類外周血淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)方法

實(shí)驗(yàn)原理染色體是在顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞系有絲分裂過(guò)程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)。因此，必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析。正常情況下，人體外周血淋巴細(xì)胞不再分裂，但植物血凝素（PHA）可刺激血中的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成淋巴母細(xì)胞，使其恢復(fù)增殖能力。因此，可采取少量外周靜脈血，做短期培養(yǎng)，培養(yǎng)至72小時(shí)細(xì)胞進(jìn)入增殖旺盛期，此時(shí)加入秋水仙素抑制細(xì)胞分裂，使細(xì)胞分裂停止在中期以獲得足夠量的分裂期細(xì)胞，經(jīng)低滲、固定、制片、染色后鏡下觀察進(jìn)行核型分析。上述制備的染...